二、问答题
1、生物样品分析前为什么要除去蛋白质?常用去蛋白质的方法有哪些?(5分)
除蛋白的意义:使结合型的药物释放出来,以便测定药物的总浓度。预防进一步的纯化过程中乳化的形成。保护仪器性能,延长使用期限。
常用去蛋白方法:①蛋白质沉淀法:溶剂解法、盐析法、强酸沉淀法、热沉淀法;②超滤法;③酶水解法
2、生物样品制备的目的是什么?(4分)
①使药物从缀合物或结合物中释放。
②使样品纯化与药物组分富集。
③满足测定方法对分析样品的要求。
④保护仪器性能,改善分析条件。
3、与常规药物分析相比,简述体内药物分析的特点?(5分)
①生物样品基质复杂;②被测物浓度低;③分析方法要求高;④实验室仪器设备要求高;⑤测定目标与数据处理复杂。
4、简单设计一个弱碱性药物血浆样品的前处理方法。(5分)
①用三氯乙酸或高氯酸等沉淀血浆蛋白质;
②然后取上清液,调节pH值呈弱碱性,使药物游离;
③加2~3倍量的有机溶剂(根据药物的极性选择溶剂)进行提取;
④提取液经浓缩(真空、或在气流下挥干),加一定量溶剂溶解残渣;
⑤离心后取上清液,采用适当方法测定。
5、简述全血、血浆和血清的制备方法。(5分)
全血:采集的血液置含有抗凝剂的试管中,轻摇混匀,既得。
血浆:采集的血液置含有抗凝剂的试管中,混匀,以2500~3000r/min离心5~10min使血细胞沉降,所得淡黄色上清液即为血浆样品。
血清:采集的血液置不含有抗凝剂的试管中,放置30min~1h,血液逐渐凝固。以2500~3000r/min离心5~10min,淡黄色的上清液体即为血清样品。
6、体内药物分析的对象和任务是什么?(6分)
对象:人体和动物的体液、组织、器官和排泄物等。
任务:①生物样品分析方法的研究。②为新药体内研究提供数据。③为临床治疗药物监测提供数据。④滥用药物监测。⑤内源性物质监测和代谢组学研究。